Inducción de ovulación en pacientes bajas respondedoras en fecundación in vitro: microdosis de acetato de leuprolide vs priming de estradiol

Objetivo: Comparar los protocolos de microdosis de acetato de leuprolide y priming de estradiol. Métodos: Estudio retrospectivo de 115 pacientes bajas respondedoras (según criterios de Bologna), evaluadas en UNIFERTES desde enero 2010 a diciembre 2012, sometidas a hiperestimulación ovárica controlada según protocolo. La inducción ovárica constó de pauta fija con gonadotropinas (hormona folículo estimulante recombinante 450 UI/día + Gonadotropina menopaúsica humana 150 UI/día); realizando disparo de ovulación con 10.000 UI gonadotropina coriónica humana urinaria al obtener 2 o 3 folículos entre 17-18 mm de diámetro. Se realizó aspiración folicular con aguja bilumen a las 35 horas del disparo, fecundación in vitro en medios secuenciales y transferencia embrionaria al día 3. El soporte de fase lútea constó de progesterona natural micronizada 600 mg/día y valerato de estradiol 4 mg/día. Se realizó prueba de embarazo cuantitativa a los quince días y verificación de embriocardia al mes. Se compara: tasa de cancelación, días de estimulación, número de ovocitos aspirados, tasa de embarazo clínico por transferencia y tasa de aborto. Resultados: Se incluyeron 115 pacientes: 69 al protocolo de microdosis y 46 al de priming de estradiol. No hubo diferencias estadísticas entre ambos protocolos en cuanto a: número de ovocitos aspirados, tasa de embarazo clínico y aborto. Los días de estimulación y la dosis total de gonadotropinas fue mayor con microdosis. Conclusiones: Aunque no hubo diferencias estadísticamente significativas entre ambos protocolos, el de priming de estradiol por tener menos días de estimulación y dosis totales de gonadotropinas menores, implica mayor bienestar de la paciente.

Objective: To compare microdose leuprolide acetate protocols and Estradiol Priming. Methods: Retrospective study of 115 low-responding patients (according to Bologna Criteria), evaluated at UNIFERTES from January 2010 to December 2012, who underwent controlled ovarian hyperstimulation as per Microdose leuprolide acetate protocol or Estradiol Priming Protocols. Ovarian induction consisted of a set standard with gonadotropins, 450UI/day recombinant follicle-stimulating hormone + 150UI/day Human Menopausal Gonadotropin; performing an ovulation trigger shot with 10,000UI urinary human chorionic gonadotropin when obtaining 2 to 3 follicles of 17-18mm diameter. Follicular aspiration is performed with double lumen needle, 35 hours from trigger shot with in vitro fertilization in sequential media, and embryo transfer on day 3. Luteal phase support consisted of 600mg/day micronized natural progesterone and 4mg/day of estradiol valerate. Quantitative pregnancy test was carried out at fifteen days and embryo cardiac activity validation at one month. The following are compared: cancellation rate, stimulation days, number of aspirated oocytes, rate of clinical pregnancy by transfer and abortion rate. Results: 115 patients were included: 69 underwent microdose leuprolide acetate protocol flare and 46 underwent estradiol priming. There were no statistical differences between both protocols with regards to: number of aspirated oocytes, rate of clinical pregnancy by transfer and abortion rate. Stimulation days and therefore, gonadotropins total dosage was greater with microdose leuprolide acetate protocol. Conclusions: Even though there were no significant statistical differences between both protocols, estradiol priming entails greater patient’s wellbeing, since it requires less stimulation days and less gonadotropin total dosages.

Molecular and morphological evidence of Taenia omissa in pumas (Puma concolor) in the Peruvian Highlands / Evidência molecular e morfológica de Taenia omissa em onça-pardas (Puma concolor) dos Andes Peruanos

Abstract A total of 41 cestodes were collected during necropsy examination on 2 pumas (Puma concolor) that were found in 2 communities in Canchis province, Cuzco region, Peru, at 4500 meters above sea level (Peruvian Andes). The cestodes were evaluated morphologically and molecularly. A fragment of the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 gene (cox1) was used as a genetic marker. All the cestodes were identified as Taenia omissa. In the present report, we give a brief description by molecular and morphological diagnosis of the cestodes and compare nucleotide sequences with previous isolates from GenBank. Upon comparison, the sequences showed a difference in the cox1 gene of 5.1 to 5.3% with other teniids sequences. This finding constitutes the first report of T. omissa in Peru and expands the geographic distribution of this parasite.

Resumo Um total de quarenta e um cestóides foram coletados durante a necropsia de duas onça-pardas (Puma concolor) encontradas em duas comunidades na província de Canchis, em Cuzco, a 4500 metros acima do nível do mar, nos Andes peruanos. Os cestóides foram avaliados morfologicamente e molecularmente. Um fragmento do gene citocromo C oxidase subunidade 1 (cox1) foi utilizado como marcador genético. Todos os cestóides foram identificados como Taenia omissa. No presente relato, dá-se uma breve descrição dos cestóides e compara-se sequências de nucleotídeos com isolados anteriores presentes no GenBank. Após a comparação, as sequências mostraram uma diferença de 5,1-5,3% entre o gene cox1 e outras sequências de tênias. Esse achado constitui o primeiro relato de T. omissa no Peru e amplia a informação sobre a distribuição geográfica deste parasita.

Longevity and viability of Taenia solium eggs in the digestive system of the beetle Ammophorus rubripes / Duração e viabilidade de ovos de Taenia solium no sistema digestivo do besouro Ammophorus rubripes

The present study evaluated the capacity of Ammophorus rubripes beetles to carry Taenia solium eggs, in terms of duration and viability of eggs in their digestive system. One hundred beetles were distributed into five polyethylene boxes, and then they were infected with T. solium eggs. Gravid proglottids of T. solium were crushed and then mixed with cattle feces. One gram of this mixture was placed in each box for 24 hours, after which each group of beetles was transferred into a new clean box. Then, five beetles were dissected every three days. Time was strongly associated with viability (r=0.89; P<0.001) and the calculated time to cero viability is 36 days. The eggs in the intestinal system of each beetle were counted and tested for viability. Taenia solium eggs were present in the beetle's digestive system for up to 39 days (13th sampling day out of 20), gradually reducing in numbers and viability, which was 0 on day 36 post-infection. Egg viability was around 40% up to day 24 post-infection, with a median number of eggs of 11 per beetle at this time. Dung beetles may potentially contribute towards dispersing T. solium eggs in endemic areas.

Este estudo avaliou a duração e viabilidade de ovos de Taenia solium no sistema digestivo do besouro Ammophorus rubripes como portador dos ovos de T. solium. Cem besouros foram distribuídos em cinco caixas de polietileno, contendo um grama de fezes bovina misturada à proglotes grávidas de T. solium trituradas. Após 24 horas, cada grupo de besouros foi transferido para uma caixa limpa e, a cada três dias, cinco besouros foram dissecados para determinar a contagem e viabilidade dos ovos nos intestinos de cada besouro. Ovos de T. solium foram detectados no sistema digestivo até 39 dias (13° dia da amostragem de 20), observando-se uma redução gradativa do número e viabilidade dos ovos, até 36 dias após a infecção. A viabilidade dos ovos foi de 40% após 24 horas da infecção, com uma média de 11 ovos por cada besouro. Besouros coprófagos têm potencial para contribuírem na dispersão dos ovos de T. solium em áreas endêmicas.

A case of nasal myiasis due to Oestrus ovis (Diptera: Oestridae) in a llama (Lama glama) / Um caso de miíase nasal devido a Oestrus ovis (Diptera: Oestridae) em lhama (Lama glama)

Infection by the larval form of Oestrus ovis (sheep bot fly) is common in many areas of Peru. This is an obligate parasite of sheep and goats, and it is the cause of oestrosis, or nasal myiasis, which can lead to severe clinical manifestations in livestock. A case of myiasis caused by O. ovis in a llama (Lama glama) in Cuzco, Peru, is reported here. This llama presented with respiratory distress and died due to bilateral hemorrhagic pneumonia. During the necropsy, six intact dipterous larvae were recovered from the nasal fossae and cranial sinuses being identified as O. ovis. This is the first report of nasal myiasis in llamas due to O. ovis in Peru.

Infecção pela forma larval de Oestrus ovis (bicho da cabeça) é comum em muitas regiões do Peru. Este é um parasito obrigatório de ovinos e caprinos, e é a causa de oestrose ou miíase nasal, que pode conduzir à manifestações clínicas graves nos animais. Relatou-se um caso de miíase causada por O. ovis numa lhama (Lama glama) em Cuzco, Peru. A lhama apresentou insuficiência respiratória e morreu de pneumonia bilateral hemorrágica. Durante a necropsia, seis larvas intactas do díptero foram recuperadas das fossas nasais e dos seios cranianos e identificadas como O. ovis. Este é o primeiro relato de miíase nasal em lhamas por O. ovis no Peru.

Comparación entre Testsimplets® y Diff-Quik para la evaluación de la morfología espermática / Comparison between Testsimplets® and Diff-Quik to assess sperm morphology

Comparar la evaluación de morfología espermática mediante dos tinciones: Testsimplets® y Diff-Quik y la eficiencia de Testsimplets® y el test de peroxidasa para evaluar leucocitos en semen. Comparamos la morfología espermática de las muestras seminales de 30 pacientes infértiles, evaluada a través de las tinciones Testsimplets® y Diff-Quik. Adicionalmente, en pacientes que presentaron más de 106 de células redondas por mL de semen (n=7), comparamos la evaluación de leucocitos por Testsimplets® y el test de peroxidasa. En el Centro de fertilidad UNIFERTES, en Caracas, Venezuela. No existen diferencias significativas en el porcentaje de espermatozoides morfológicamente normales, siguiendo el criterio estricto de Kruger, entre ambas tinciones. Encontramos diferencias significativas en los porcentajes de los siguientes defectos morfológicos espermáticos, entre tinción: cabeza piriforme, pieza media doblada, irregular o con gota citoplasmática. No se encontraron diferencias significativas en la evaluación de leucocitos en semen mediante Testsimplets® y el test de peroxidasa. Testsimplets® es práctico para ahorrar tiempo y, consecuentemente, mejorar la eficiencia en el tiempo de entrega de resultados. Sin embargo, es considerablemente más costoso que Diff-Quik

To compare sperm morphology by Testsimplets® and Diff-Quik staining. To compare the efficiency of Staining cellular peroxidase and Testsimplets® to assess leukocytes in semen. We compared sperm morphology of 30 infertile patients evaluated by Testsimplets® and Diff-Quik staining. Additionally, in patients with more than 106 round cells per ml semen (n=7), we compared the assessment of leukocytes by Staining cellular peroxidase and Testsimplets®. Fertility clinic UNIFERTES, in Caracas, Venezuela. There was no significant difference in the percentage of morphologically normal sperm, according to Kruger’s strict criteria, between both stains. We found significant differences in the percentages of the following sperm morphological defects between staining: pyriform head, folded middle piece, irregular and presence of cytoplasmic droplets. There was no significant difference in the assessment of leukocytes in semen by Staining cellular peroxidase and Testsimplets®. Testsimplets® is practical for saving time and consequently, improving the efficiency in the delivery time of results. Nonetheless, it is considerably more expensive than Diff-Quik

Infección por Chlamydia trachomatis / Chlamydia trachomatis infection

Determinar la prevalencia de la infección por Chlamydia trachomatis en una población de parejas infértiles. Validar la eficacia del diagnóstico de anticuerpos anti Chlamydia para tratar, prevenir y controlar la infección por C. trachomatis. Justificar la necesidad de implementar el monitoreo de rutina para administrar el tratamiento oportuno de la infección por C. trachomatis. Se determinó la prevalencia de la infección por Chlamydia trachomatis en 4 619 pacientes, 2607 mujeres y 2012 hombres en edades reproductivas, entre 1999 y 2008 por problemas de infertilidad. Se detectaron anticuerpos anti-Chlamydia trachomatis (IgG, IgA e IgM) por SeroELISA (Savyon Diagnostics Ltd.) de 1999 a 2005; desde 2006 hasta 2008 se utilizó el kit InmunoComb II (Orgenics). Centro de fertilidad UNIFERTES, Caracas, Venezuela. Se encontró una prevalencia en mujeres de 25,40 ± 6,26 por ciento; y en los hombres de 31,12 ± 2,88 por ciento. La prevalencia de la infección por C. trachomatis en parejas infértiles es alta y no ha disminuido en los últimos 10 años. Se recomienda implementar en Venezuela un monitoreo de rutina para el diagnóstico de C. trachomatis, incluyendo su determinación en el control ginecológico anual y en las evaluaciones urológicas a hombres jóvenes, a fin de prevenir que la infección pase a ser crónica

To determine the prevalence of Chlamydia trachomatis infection in infertile couples. To evaluate the efficiency of the Chlamydia trachomatis screening programs. To establish the need of implementing the routine early diagnosis and opportune treatment of the infection. Prevalence of Chlamydia trachomatis infection was determined in 4619 patients, 2607 women and 2012 men in reproductive agesbetween 1999 and 2008. Anti-chlamydia and C.trachomatis antobodies (IgG, IgA and IgM) were detected by SeroELISA (Savyon Diagnostics Ltd.) from 1999 to 2005; and by the ImmunoComb II kit (Orgenics) from 2006 to 2008. Fertility clinic UNIFERTES in Caracas, Venezuela. A prevalence of 25,40 ± 6,26 percent was found in women and a prevalence of 31,12 ± 2,88 percent was found in men. Prevalence of the C. trachomatis infection in infertile couples is high and has not decreased over the last 10 years. Implementation of routine screening programs for C. trachomatis detection is recommended, including its assessment in annual gynecological controls, as well as in urologic evaluations in young men, in order to prevent the infection from being chronic

Comparación de la sobrevida y de los patrones de movilidad de espermatozoides incubados en medios HAM´S-F10 y G-IVF / Comparison of survival and mobility patterns of sperm incubated in HAM'S-F10 and G-IVF media

Comparar la sobrevida y la movilidad de espermatozoides incubados en medios HAM’S-F10 y G-IVF. Estudio prospectivo. Se incubaron submuestras de espermatozoides recuperados por gradientes de densidad de 31 hombres normospérmicos, en los medios respectivos por 18 a 20 horas en una atmósfera de 5 por ciento CO2. Posteriormente se evaluaron la sobrevida y la movilidad espermáticas. Las direfencias encontradas se evaluaron mediante la t de Student para muestras apareadas con transformación arcoseno. Unidad de Fertilidad Unifertes, Clínica El Ávila. Caracas, Venezuela. La sobrevida y la movilidad progresiva espermáticas fueron significativamente mayores en el grupo tratado con G-IVF (P<0,01). Consecuentemente, la media del porcentaje de espermatozoides inmóviles fue significativamente menor (P<0,01). La sobrevida y la movilidad progresiva en espermatozoides incubados con G-IVF fueron significativamente mayores que con HAM’S-F10

To compare survival and motility of sperm incubated in HAM’S-F10 and G-IVF media. Subsamples of motile sperm recovered by density gradients of 31 normospermic men were incubated in each medium for 18-20 hours in 5 percent CO2 atmosphere. Subsequently, sperm survival and motility were assessed. Unidad de Fertilidad Unifertes, Clínica El Ávila. Caracas, Venezuela. Average sperm survival and progressive motility were significantly higher in G-IVF (P<0.01). Consequently, average percentage of immotile sperm was significantly lower (P<0.01). Sperm survival and progressive sperm motility were significantly higher in G-IVF medium than in HAM’S-F10.

Muy alta tasa de embarazos con transferencia de blastocistos por medios secuenciales: Primeros embarazos en Venezuela / Very high pregnancy rate with blastocyst transfer using sequential medium: first pregnancies in Venezuela

Mejorar las tasas de embarazo clínico y de implantación en fecundación in vitro mediante el cultivo y transferencia de blastocitos. Se controló la estimulación ovárica con ultrasonografía transvaginal y estradiol sérico. Los ovocitos aspirados por vía transvaginal, fueron incubados en medios secuenciales e inseminados con 20.000 espermatozoides móviles por ovocito. La presencia de pronúcleos se evaluó a las 16 horas posinseminación, y se revisó la división celular a intervalos de 24 horas. Al quinto o sexto día posinseminación se realizó la transferencia con embriones que se desarrollaron hasta el estadio de blastocisto. Programa de fecundación in vitro de UNIFERTES, Clínica el Avila. De 37 óvulos, hubo una tasa de fecundación de 64,5 por ciento, de clivaje 100 por ciento, y de estos, hubo 87,5 por ciento blastocitos, se obtuvo una tasa de embarazos clínicos del 100 por ciento y una tasa de implantación del 50 por ciento. Los medios secuenciales soportan bien el desarrollo de los embriones y la formación de blastocistos viables, mejorar la tasa de implantación y embarazo clínico de la fecundación in vitro

Fecundación in vitro en UNIFERTES: Clínica El Avila 1996 / In vitro fertilization in UNIFERTES: Clinica el Avila 1996

Comparar la tasa de embarazos clínicos por fecundación in vitro de UNIFERTES con las reportadas en al literatura. Se controló la respuesta a la estimulación ovárica con ultrasonografía transvaginal y estradio sérico. Los ovocitos aspirados por vía transvaginal, fueron incubados 5 horas e inseminados con 50 000 espermatozoides mótiles por ovocito. La presencia de pronúcleos se evaluó a las 16 horas posinseminación, 24 horas más tarde se observó la división celular y, la transferencia de embriones se realizó a las 48 horas postinseminación